分光光度法則是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。元析分光光度計就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。
常用的波長范圍為:(1)200~400nm的紫外光區(qū),(2)400~760nm的可見光區(qū),(3)2.5~25μm(按波數(shù)計為4000cm<-1>~400cm<-1>)的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計(或比色計)、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計。為保證測量的精密度和準(zhǔn)確度,所有儀器應(yīng)按照國家計量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定,定期進(jìn)行校正檢定。
單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時,被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:
分光光度計屬于精密儀器,應(yīng)當(dāng)妥善保管和精心維護(hù),這樣才能保證分光光度計長期使用、長期的穩(wěn)定可靠、測量精度高。
分光光度計的環(huán)境要求:
1、環(huán)境溫度在條件容許的情況下,盡量保持在15-30攝氏度之間,這樣能保持電器件穩(wěn)定工作,不易老化,使分光光度計不易損壞,燈源的使用壽命得到延長。若條件不容許,在高溫的情況下,縮短開機(jī)時間,使用分光光度計,使電器件不要長期保持在高溫下。在低溫下,使預(yù)熱時間比常溫下的預(yù)熱時間要長,這樣能保證在儀器穩(wěn)定的情況下進(jìn)行測試。
2、環(huán)境濕度在條件容許的情況下,盡量保持在60%以下,這樣能保證光度計內(nèi)部的光學(xué)件和電器件不易受潮、腐蝕、和上霉。若條件不容許,在高濕度和低濕度的情況盡量保持通風(fēng)。
3、環(huán)境在條件容許的情況下盡量保持潔凈,打掃環(huán)境時動作不宜太大,不要揚(yáng)起灰塵,打掃之前用防塵罩蓋上分光光度計,不要讓灰塵進(jìn)入分光光度計內(nèi)部。
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